Odyssey® M - wszechstronny, laserowy system detekcji i analizy obiektów biologicznych

Odyssey® M jest najbardziej wszechstronnym systemem służącym do jakościowej i ilościowej analizy membran wykonanych techniką Western blot, żeli elektroforetycznych DNA, RNA i białek, analizy mikropłytek oraz skanowania preparatów immunocytochemicznych. Aparat umożliwia rejestrację danych w 18 kanałach, w tym pomiar luminescencji (bioluminescencji i chemiluminescencji) oraz pomiar fluorescencji w bliskiej podczerwieni i w zakresie promieniowania widzialnego. Podsumowanie wszystkich dostępnych kanałów oraz przykłady zastosowań systemu przedstawione zostały w Tabeli.

Niezależnie od rodzaju rejestrowanego procesu Odyssey® M charakteryzuje się szerokim zakresem pracy liniowej wynoszącym >6 log. Umożliwia to detekcję i analizę zarówno niskich jak i wysokich stężeń prób znajdujących się na tej samej membranie. Całkowita powierzchnia skanowania wynosi 25x18 cm, powierzchnia skanowania dla preparatów chemiluminescencyjnych wynosi 15x11 cm.

Analiza fluorescencyjna

Do analizy procesu fluorescencji jako źródła wzbudzenia zastosowano cztery lasery emitujące fale o długościach 488 nm, 520 nm, 685 nm oraz 785 nm, natomiast do rejestracji emitowanego sygnału wykorzystano detektory półprzewodnikowe w przypadku fluorescencji oraz matrycę CCD w przypadku chemiluminescencji.  Dzięki zastosowaniu laserów emitujących światło o dużej intensywności i precyzyjne dostosowane do używanych barwników uzyskano niezwykle wysoką czułość systemu.

Pomiary fluorescencji zarówno w bliskiej podczerwieni jak i w zakresie promieniowania widzialnego są wykorzystywane przede wszystkim do precyzyjnej analizy ilościowej np. membran wykonanych techniką Western blot oraz w technice  In-Cell Western. 

Analiza Chemiluminescencyjna

Zjawisko chemiluminescencji, czyli emisja światła powstająca w wyniku reakcji chemicznych jest powszechnie wykorzystywana do analizy membran wykonanych techniką Western blot. Cechą wyróżniającą technikę ECL (Enhanced chemiluminescence) jest zastosowanie w reakcji enzymatycznej enzymów: peroksydazy chrzanowej (HRP) lub fosfatazy alkalicznej (AP). System Odyssey® M może zostać opcjonalnie wyposażony w moduł chemiluminescencyjny (Odyssey M Model 3350)  pozwalający na skanowanie membran o powierzchni 15x11 cm.

https://www.licor.com/bio/applications/chemiluminescent-western-blots

Analiza w świetle przechodzącym

Ten typ analizy stosuje się do żeli barwionych srebrem lub Coomassie, a także do analizy skrawków i tkanek barwionych hematoksyliną oraz eozyną. Technika polega na oświetleniu badanej próbki światłem widzialnym (lub w niektórych przypadkach światłem UV), które zostaje częściowo zaabsorbowane przez badany związek, a system rejestruje wyłącznie poziom transmisji.  Długość fali oświetlenia jest wybierana na podstawie charakterystyki widmowej próbki w celu uzyskania najlepszego kontrastu.

Analiza w świetle odbitym

Zastosowanie techniki epiluminescencji umożliwia obrazowanie próbek, które nie są przezroczyste np. membran wykonanych techniką Western blot z użyciem barwinków kolorymetrycznych lub blotów chemiluminescencyjnych, w których zastosowano markery masy cząsteczkowej barwione kolorymetrycznie. Podobnie jak w przypadku analizy w świetle przechodzącym, długość fali oświetlenia jest wybierana na podstawie charakterystyki widmowej próbki w celu uzyskania najlepszego kontrastu.

Obsługa za pomocą jednego przycisku.

Oprogramowanie sterujące LAS, wspólne dla Odyssey^® M, Odyssey^® Dlx i Odyssey^® XF umożliwia szybki i łatwy zapis obrazów oraz ich katalogowanie.